Evaluación experimental de histovacunas empleadas para el tratamiento de la papilomatosis bovina

Abstract

En esta investigación se evaluaron dos histovacunas, las cuales consisten en una histovacuna de carácter comercial (histovacuna de la papilomatosis bovina) constituida en un 70% por papilomas y un 30% de excipientes más adyuvante; y una alternativa (Histovac). Esta histovacuna se preparó en el Laboratorio de Biología Celular y Molecular de la Universidad del Cauca mediante la extracción de proteínas en solución salina 2.6 M, SSC y alcoholes al 70 y 95 % a partir de los papilomas previamente desqueratinizados Posteriormente por protocolos de inmunización con adyuvante completo e incompleto de Freunds para la inmunización primaria y secundaria se indujeron las vacunas, para el análisis de su correspondiente respuesta inmune (cantidad de inmunoglobulina G producida) y con base en la extracción de inmunoglobulinas por procesos de limpieza de hemoglobina, su consecuente extracción de estas por precipitación con sulfato de amonio saturado, EDTA 0.2 M, pH 7.8 y por métodos de diálisis contra PBS 0.1 M se procedió a procesos de electroforesis por los cuales se determinan sus dos bandas, mediante la técnica de SDS page y por métodos de cuantificación de proteínas con la aplicación de la técnica de Bradford se determina la eficiencia de producción de inmunoglobulina G en relación a las dos vacunas. La comparación de las histovacunas se sometió a análisis estadísticos (análisis de varianza) los cuales se aplicaron en tres grupos experimentales de conejos (Blanco Nuevazelanda), grupos organizados aleatoriamente: grupo I, grupo II, grupo III; estos grupos se les indujo respectivamente un 0.5ml de un placebo compuesto por PBS y su adyuvante respectivo para la inducción primaria y secundaria. Posteriormente se indujo en el grupo II, 10 mg de la histovacuna Probiol en 0.5 ml de (PBS/adyuvante completo de Freunds) y 10 mg de histovacuna “Histovac” en condiciones similares, por último se realiza la inducción secundaria de las mismas cantidades de inmunógeno en adyuvante incompleto de Freunds. Los resultados finales indican una producción significativa de la vacuna Histovac en relación con la de carácter comercial.

In this investigation two histology-vaccines was evaluated, which consist on a histovacuna of commercial character (histovacuna of the bovine papilomatosis) constituted in 70% by papillomas and 30% of exicipients but adjuvant; and an alternative (Histovac) carried out in the laboratory of cellular and molecular biology of the university of the Cauca he/she carries out for the extraction of proteins in saline solution 2.6 M, SSC and alcohols to the 70 and 95% from of the papillomas previously nonqueratinized. Later on for immunization protocols with complete and incomplete adjuvant of Freunds for the primary and secondary immunization the vaccines were induced, for their analysis of their corresponding immune answer (quantity of inmunoglobulin produced G) and with base in the immunoglobulins extraction for processes of hemoglobin cleaning, their consequent extraction of these for precipitation with sulfate of saturated ammonium, EDTA 0.2 M, pH 7.8 and for dialysis methods against PBS 0.1 M you proceeded to electrophoresis processes for which their two bands are determined in gels of SDS page and for methods of proteins quantification with the application of Bradford the efficiency of inmunoglobulin production G is determined in relation to the two vaccines The comparison of the histology-vaccines underwent statistical analysis (variance analysis) which were applied in three experimental groups of rabbits (White), organized groups aleatorily: group I, group II, group III; these groups were induced a 0.5 ml of a compound placebo respectively by PBS and their respective adjuvant for the primary and secondary induction. Followed it was induced in the group II, 10 mg of the histovacuna Probiol in 0.5 ml of (complete PBS/adjuvant of Freunds) and 10 histovacuna mg " Histovac " under similar conditions for I finish he/she is carried out the secondary induction of the same inmunógeno quantities in incomplete adjuvant of Freunds. The final results indicate a significant production of the vaccine Histovac in connection with that of commercial character.