Desempeño de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) casera IS6110 en el diagnóstico de tuberculosis pulmonar y extrapulmonar en el departamento del Cauca

Abstract

La tuberculosis (TB) es una enfermedad infectocontagiosa, que constituye un problema grave de salud pública en los países en desarrollo. En el mundo ocurren 8,8 millones de casos/año y se mueren 1,7 millones de personas. El programa nacional para el control de TB en Colombia basa la confirmación diagnóstica de los enfermos pulmonares en la tinción de tres muestras de esputo y con esta técnica se puede diagnosticar 50 – 75% de los casos pulmonares y del 0 - 20% de los extrapulmonares. Uno de los problemas que persiste hoy día y obstaculiza el control de la TB es la dificultad para establecer rápidamente el diagnóstico antes que el enfermo trasmita la infección a otros individuos. Con frecuencia el diagnóstico de TB se realiza teniendo en cuenta diversos criterios como la presentación clínica, radiológica, histopatológica, inmunológica y epidemiológica, ya que el criterio microbiológico que es el definitivo es muchas veces negativo. Los métodos microbiológicos son la tinción de Ziehl-Neelsen (ZN) de muestra de esputos, líquidos o tejidos obtenidos de los órganos afectados. La otra técnica utilizada, cuando tres tinciones son negativas es el cultivo. El cultivo aumenta la probabilidad de diagnosticar a 80- 90% con las formas pulmonares y hasta 50% en las extrapulmonares, pero tiene la desventaja de demorar el diagnóstico hasta dos meses mientras crece la micobacteria. Los métodos moleculares como la PCR ofrecen ventajas: es capaz de detectar pocas micobacterias hasta 1 a 10 por muestra y por ende sus resultados son mucho más rápidos, 1 a 2 días constituyendo una alternativa diagnóstica de las pruebas tradicionalmente utilizadas. En el Laboratorio de Inmunología y Biología Molecular se dispone de la infraestructura apropiada y una prueba de PCR casero IS6110 previamente estandarizado (Díaz ML y col., 2005) que detectó un fg de ADN de cultivo de M. tuberculosis y amplificó el fragmento esperado hasta en 500 fg de ADN de muestra clínica de cultivo positivo. Dicha prueba también identificó la TB en 92.3% de muestras líquidas de 13 pacientes con TB establecida y 66.7 % con TB clínica, con especificidad del 95%. Este trabajo se desarrolló con el fin de determinar el desempeño del PCR casero IS6110 para identificar la TB en un mayor número de pacientes y en diferentes muestras clínicas con diferentes formas de la enfermedad. Se analizaron 78 casos de TB y 76 individuos no TB; el PCR fue positivo en 98% de 49 TB pulmonar establecida y 100% de 6 TB extrapulmonar establecida. El ZN fue positivo en 98% y 66.7%. El cultivo positivo en el 80.8 % y 100% respectivamente. En TB clínica PCR fue positivo en 100% de 4 TB pulmonar y 68.4% de 19 TB extrapulmonar. Ninguna de las formas de TB clínica fue positiva para ZN o el cultivo. Todos los individuos sin TB fueron PCR negativos. La sensibilidad del PCR en TB establecida es 98.2%, TB clínica 73.9% y todas las formas 91%. La especificidad fue del 100%. Se evidencia que el PCR contribuye al diagnostico de TB ya que es mejor que el ZN y cultivo, con una especificidad del 100% y además ahorra tiempo para identificar pacientes con diferentes formas de TB.