Estudio de la actividad anticoagulante, antioxidante y fitotóxica del extracto etanólico total de hojas de Cattleya warscewiczii sanderiana

Abstract

En el presente trabajo de investigación se llevó a cabo el análisis de los posibles constituyentes del EET de hojas, raíz y bulbos de C. warscewiczii sanderiana perteneciente a la familia Orchidaceae a través del tamizaje fitoquímico. El estudio de la actividad antioxidante se llevó a cabo utilizando los métodos de DPPH, ABTS, Rancimat, complementado con la determinación cuantitativa de fenoles y flavonoides totales. También se estudió la actividad fitotóxica, con el ensayo de Allium cepa, la actividad citotóxica, por medio del ensayo con Artemia. franciscana , la actividad anticoagulante de los extractos etanólicos frente a la coagulación del plasma sanguíneo con veneno de la serpiente Bothops asper, se realizó la identificación cromatográfica para fenoles, empleando la técnica de GC-MS y cálculos teóricos de mecánica molecular (docking molecular) para predecir las posibles dianas terapéuticas donde puedan ser empleados estos compuestos. En los ensayos de tamizaje fitoquímico se identificó la presencia de alcaloides, flavonoides, triterpenos y/o esteroides y cardiotónicos en los EET de C. warscewiczii. En el ensayo frente al radical DPPH se encontró un valor de IC50 de 117.44 ± 4.72 ppm; 151.04 ± 6.20 ppm y 253.94 ± 6.45 ppm para los EET de raíz, bulbos y hojas respectivamente. De modo similar en el ensayo de actividad antioxidante frente al radical ABTS se obtuvo un valor de IC50 = 1124.28 ± 15 ppm para bulbos, IC50 =1212.75 ± 124.74 ppm para raíz y IC50 =2091.0 ± 6808 ppm para hojas. El contenido fenólico por medio del ensayo de Folin-Ciocalteu indicó 1730.95 ± 2.75 mg AG/g ES, para el EET de la raíz De C. warscewiczii, seguido de los bulbos con 1478.57 ± 12.60 mg AG/g ES y las hojas con 1216.17 ± 15.31 mg AG/g ES, con el mismo comportamiento en el ensayo para flavonoides con 1947.78 ± 48.47 mg Q/g ES en raíz, 1678.68 ± 6 4.12 mg Q/g ES en los bulbos y 1666.52 ± 60.56 mg Q/g ES en las hojas. En el ensayo de Rancimat hubo un factor de protección mayor para los EET de hojas y bulbos de C. warscewiczii y no se presentó ninguna variación en el caso del EETde la raíz respecto al aceite de coco virgen empleado. En el ensayo de fototóxicidad con Allium cepa se obtuvo un IC50=188.08 ± 5.24; 217.43 ± 7.10 y 267.24± 5.91 ppm respectivamente para raíz, hojas y bulbos de la especie estudiada. Así mismo para el ensayo de citotóxico con A. franciscana dio valores de CL50 de 85.27 ± 22 ppm en raíz, 211.37±26.46 ppm para bulbos y 344.17 ± 21.48 ppm en hojas. En el caso de la actividad anticoagulante de los EET de raíz y bulbos de C. warscewiczii fue mayor que la presentada por las hojas a una concentración de 1000 ppm, respecto al veneno de B.asper. A nivel espectral se logró la identificación del compuesto Agidol 2 con l técnic de GC-MS, presente en hojas, raíz y bulbos de C. warscewiczii y se observó una buena interacción de éste con las proteínas Acetilcolinesterasa, Protombina y Monoaminooxidasa B.

In the present work of investigation was carried out the analysis of the possible constituents of the EET of root leaves and bulbs of C. warscewiczii sanderiana belonging to the family Orchidaceae through phytochemical screening. The study of the antioxidant activity by the methods of DPPH, ABTS, Rancimat, complemented with the quantitative determination of phenols and total flavonoids. The phytotoxic activity was also studied, with the A. cepa assay, the cytotoxic activity, by means of the A. franciscana test, the anticoagulant activity of the ethanolic extracts against the coagulation of the blood plasma with snake venom B. asper, was carried out the chromatographic identification for phenols, using the GC-MS technique and the subsequent theoretical calculations of molecular mechanics (molecular docking) to predict the possible therapeutic targets where these compounds can be used. Among the most relevant results in phytochemical screening, the presence of alkaloids, flavonoids, triterpenes and / or stereotypes and cardiotonics was identified in TSEs of C.warscewiczii. In the assay against the DPPH radical, an IC50 value of 117.44 ± 4.72 ppm was found; 151.04 ± 6.20 ppm and 253.94 ± 6.45 ppm for root test, bulbs and leaves respectively. Similarly, in the assay of antioxidant activity against the ABTS radical, an IC50 value = 1128.28 ± 15 ppm was obtained for bulbs, IC50 = 1212.75 ± 124.74 ppm for root and IC50 = 2091.0 ± 6808 ppm for leaves. The phenolic content by means of the Folin-Ciocalteu test indicated 1730.95 ± 2.75 mg AG / g ES, for the EET of the root of C.warscewiczii, followed by the bulbs with 1478.57 ± 12.60 mg AG / g ES and the leaves with 1216.17 ± 15.31 mg AG / g ES, with the same behavior in the test for flavonoids with 1947.78 ± 48.47 mg Q / g ES in root, 1678.68 ± 64.12 mg Q / g ES in the bulbs and 1666.52 ± 60.56 mg Q / g ES in leaves. In the Rancimat test, there was a higher protection factor for the EET of leaves and bulbs of C. warscewiczii and there was no variation in the case of the EET of the root with respect to the virgin coconut oil used. In the phototoxicity test with A. cepa an IC50 = 188.08 ± 5.24 was obtained; 217.43 ± 7.10 and 267.24 ± 5.91 ppm respectively for root, leaves and bulbs of the species studied. Likewise, for the cytotoxic assay with A.franciscana, it gave CL50 values of 85.27 ± 22 ppm in the root, 211.37 ± 26.46 ppm for bulbs and 344.17 ± 21.48 ppm in leaves. In the case of the anticoagulant activity of the EET of root and bulbs of C.warscewiczii, it was greater than that presented by the leaves at a concentration of 1000 ppm, with respect to the B.asper venom. At the spectral level, the identification of the compound Agidol 2 whith the tecnic GC-MS, present in leaves, root and bulbs of C. warscewiczii was achieved and a good interaction of this was observed with the proteins Acetylcholinesterase, Protombine and Monoaminooxidase B.